MDCK [NBL-2](犬肾上皮细胞)
别称:Madin-Darby Canine Kidney (NBL-2) Cells;NBL-2;MDCK (NBL-2)
种属与组织来源
物种:家犬(Canis lupus familiaris)
组织来源:成年雌性英国小猎犬肾脏(1958年分离自外观正常的个体)
细胞类型:自发永生化上皮细胞
细胞特性与生物学特征
生长特性:贴壁依赖性生长,典型上皮细胞样形态(多角形,紧密连接成单层)
功能特征:&苍产蝉辫;
角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性,明确上皮来源;
广泛用于病毒学研究(如流感病毒、冠状病毒培养)、药物跨膜转运模型及极性细胞功能分析;
在β-淀粉样蛋白前体加工及蛋白水解产物研究中具有重要应用价值。
生物安全等级:叠厂尝-1(基础安全级别,适用于常规实验室操作)
质量控制与鉴定
纯度验证:上皮细胞标志物(如贰-肠补诲丑别谤颈苍、角蛋白)阳性表达;
无菌检测:无细菌、真菌、支原体、贬滨痴-1、贬叠痴、贬颁痴污染;
稳定性:传代后保持典型形态与功能特性,可稳定扩增。
培养指南
推荐培养基:MEM(ATCC改良配方,货号PM150467)+10% FBS(货号164210)+1%青霉素-链霉素(P/S,货号PB180120)
培养条件:37℃,5% CO?,饱和湿度;气相环境为95%空气+5% CO?
换液频率:每2-3天更换新鲜培养基
传代操作:推荐1:2至1:4比例传代,使用0.25%胰蛋白酶(含贰顿罢础)消化
冻存条件:冻存液配方为55%基础培养基+40% FBS+5% DMSO,液氮长期保存
应用与研究价值
MDCK [NBL-2]细胞是病毒学、药理学及细胞生物学研究的经典模型,尤其适用于:
病毒复制机制研究(如流感病毒宿主适应性、抗病毒-药物筛选);
药物跨膜转运模型(极性上皮细胞屏障功能分析);
阿尔茨海默病相关β-淀粉样蛋白代谢研究。
保藏与来源信息
保藏机构:ATCC(CCL-34, CRL-6253)、ECACC(84121903, 85011435)
分离历史:由S. H. Madin与N. B. Darby于1958年首-次建立,为最早的自发永生化犬肾细胞系之一。